首页> 蛋白 抗体> 蛋白定量> 蛋白定量
TEV Protease
畅销新品,火爆热销!
官方正品,质量保证!
价格 998.00
运费 10.00
规格 1000U  1000U×5
累计成交 0
数量
包 库存999包
收藏商品(0人气)
品牌 :TEV Protease
货号 :PA131-01
商品毛重 :50.00g
商品名称 :RNA提取系列 300bp-10kb
规格 :1000U
商品产地 :北京
单位 :

温度:

TEV Protease(10 U/μl)长期储存于-80℃,可保存2年;或小量分装后保存于-20℃,可保存6个月,避免反复冻融。10×TEV Buffer置于-20℃保存即可。

产品介绍:

TEV Protease (烟草蚀纹病毒蛋白酶;Tobacco etch virus protease) 是来源于烟草蚀纹病毒(TEV) Nla的重组蛋白酶,此蛋白酶被用来切除纯化后融合蛋白的亲和标签。TEV Protease具有很强的位点特异性,能够识别EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu- Tyr-Phe- Gln-Gly),最普通的是ENLYFQG,其切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸或丝氨酸之间。该酶在PH 5.5-8.5和4-30℃的广泛范围内皆有活性,使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而修改。TEV Protease自大肠杆菌表达经亲和纯化的重组蛋白酶。TEV Protease带有多聚组氨酸标签,酶切反应完毕后可通过亲和层析去除。

酶活性单位定义:

在1×TEV Buffer (50 mM Tris-HCl, pH8.0, 0.5 mM EDTA, 1 mM DTT) 中,30℃条件下反应1 h,能够切割3 µg的反应底物达85%以上所需的酶量定义为一个活性单位。

应用:融合蛋白标签剪切去除。

操作方法 

  若蛋白为热不稳定性,请在4℃孵育较长时间或增加酶的用量。

 

  1.在 EP 管中配置如下反应体系:

QQ截图20190927095029.png

  2.混匀上述体系后于30℃孵育,在 1、2、4、6小时分别吸出30 μl上述反应液,置于单独的EP管中。

 

  3.向上述EP管中加入20 μl 2×SDS Loading Buffer, 置于-20℃。

  4.取30 μl样品进行SDA-PAGE分析。

 

注意事项

为达到最好的酶切效果,请保证重组蛋白为部分或完全纯化的蛋白。